Chargement Évènements

« Tous les Évènements

  • Cet évènement est passé

Soutenance de thèse – Florelle Domart

15 octobre 2019 / 09:30 - 11:30

Nano-imagerie corrélative de fluorescence X synchrotron et de super résolution des métaux et des protéines dans les synapses de neurones d’hippocampe

Venue: Centre Broca Nouvelle-Aquitaine / Salle de conférence


Florelle Domart
IINS

Thèse dirigée par
– Richard Ortega du CENBG
– Daniel Choquet de l’IINS

Résumé

Les éléments chimiques métalliques tels que Fe, Cu ou Zn sont présents en quantité infime dans le cerveau.  Le rôle de ces métaux traces dans les fonctions neuronales, telles que la transmission synaptique et les processus de mémorisation, reste encore largement à élucider. En outre, une dyshoméostasie des métaux est retrouvée dans de nombreuses neuropathologies, telles que maladie d’Alzheimer, de Parkinson ou sclérose latérale amyotrophique. Les mécanismes d’interaction des métaux traces au niveau neuronal sont difficiles à décrire faute de méthodes analytiques possédant une résolution et une sensibilité adaptées pour en déterminer la distribution à l’échelle synaptique. La spectrométrie de fluorescence-X synchrotron (SXRF) est une méthode d’analyse chimique multi-élémentaire permettant de décrire la distribution quantitative de ces éléments à l’échelle subcellulaire avec une résolution nanométrique (40 nm avec la ligne ID16A du synchrotron ESRF) et une très haute sensibilité. Afin d’interpréter avec précision les résultats d’imagerie chimique, nous avons développé un protocole pour corréler l’imagerie nano-SXRF avec la microscopie super résolutive de déplétion par émission stimulée (STED) permettant ainsi la corrélation des distributions des métaux avec celle de protéines cibles en super résolution. Nous avons marqué les microtubules et l’actine-F de neurones primaires d’hippocampe de rat puis imagé le cytosquelette par microscopie STED avant de déterminer par spectrométrie SXRF les distributions des éléments P, S, Fe, Cu et Zn. Nous avons ainsi mis en évidence la colocalisation du Zn et des microtubules au niveau dendritique ainsi qu’une localisation du Cu essentiellement dans le cou des épines dendritiques riches en F-actine, et une distribution du Fe sous forme de points très localisés dans les dendrites. Ces résultats ont révélé le rôle essentiel du Zn dans l’architecture du cytosquelette des neurones d’hippocampe et la méthode d’imagerie corrélative développée ouvre de nouvelles perspectives pour l’étude des dyshoméostasies des métaux dans les maladies neurodégénératives.

Mots clés : chimie analytique, neurobiologie, métaux traces, synchrotron, synapse, microscopie corrélative

Publications

Correlative synchrotron nano X-ray fluorescence and STED super resolution imaging of metals and proteins in dendritic spines ; Florelle Domart, Peter Cloetens, Stéphane Roudeau, Asuncion Carmona, Emeline Verdier, Daniel Choquet and Richard Ortega – submitted

Zinc and Copper Effects on Stability of Tubulin and Actin Networks in Dendrites and Spines of Hippocampal Neurons.Perrin L, Roudeau S, Carmona A, Domart F, Petersen JD, Bohic S, Yang Y6, Cloetens P, Ortega R ; ACS Chem Neurosci. 2017 Jul 19;8(7):1490-1499.

Jury

KUHN Alexander – Professeur, ENSCPB, Bordeaux
Examinateur

CARRIERE Marie – Chercheuse CEA, HDR, Grenoble
Rapporteuse

BUISSON Alain – Professeur, Université de Grenoble Alpes
Rapporteur

ISAURE Marie-Pierre – Maître de Conférences, HDR, IPREM Pau
Examinatrice

THOUMINE Olivier – DR CNRS, IINS, Bordeaux
Examinateur

ORTEGA Richard – DR CNRS, CENBG, Bordeaux-Gradignan
Directeur de thèse

CHOQUET Daniel – DR CNRS, IINS, Bordeaux
Co-directeur de thèse

CLOETENS Peter – Chercheur ESRF, Grenoble
Invité

Prochainement

Pour la communauté scientifique


Pour tous

> Tous les événements

Pour ne rien manquer !

Détails

Date :
15 octobre 2019
Heure :
09:30 - 11:30
Catégorie d’Évènement: