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SUMMARY:Soutenance de thèse - Adèle Drouet
DESCRIPTION:Lieu : Centre Broca \nSoutenance en français \n\nAdèle Drouet \nÉquipe : Mécanismes des processus adaptatifs dans le cerveau (Letellier)\nIINS \nThèse dirigée par Olivier Thoumine \nTitre\n« Localisation\, dynamique et organisation nanométrique de la molécule d’adhérence synaptique neuroligine-1 » \n(Localization\, dynamics and nanoscale organization of the synaptic adhesion molecule neuroligin-1) \nRésumé\nLes neuroligines sont des molécules d’adhérence essentielles au développement et à la fonction des synapses\, et sont la cible de mutations génétiques associées aux troubles du spectre autistique chez l’Homme. Dans cette thèse\, j’ai souhaité élucider la localisation synaptique\, la dynamique membranaire et l’organisation à l’échelle nanométrique de la neuroligine-1 (NLGN1). \nDans un premier temps\, j’ai eu recours à des stratégies de surexpression ou de remplacement protéique. J’ai ainsi démontré un temps de résidence synaptique important de la NLGN1 étiquetée\, suggérant sa stabilisation aux synapses via de multiples interactions extracellulaires et intracellulaires. \nEnsuite\, j’ai utilisé une nouvelle lignée de souris knock-in conceptualisée dans l’équipe\, exprimant la NLGN1 endogène étiquetée (bAP-NLGN1)\, qui permet sa visualisation et sa purification sans altération de son expression. J’ai montré par pull-down que la NLGN1 native peut se lier aux autres isoformes NLGN2 et NLGN3\, ainsi qu’à la PSD-95 et la géphyrine\, des protéines d’échafaudage spécifiques des synapses excitatrices et inhibitrices. Par microscopie à épifluorescence\, j’ai également démontré sa localisation à la fois aux synapses excitatrices et inhibitrices. Enfin\, par imagerie de super-résolution dSTORM\, j’ai montré que la NLGN1 s’organise en nanodomaines alignés avec des structures présynaptiques\, dont le nombre augmente proportionnellement à la taille de la post-synapse. \nCes résultats apportent un nouvel éclairage sur la localisation et l’organisation nanométrique de la NLGN1 endogène\, et remettent en question le point de vue historique selon lequel la NLGN1 est spécifique des synapses excitatrices. De plus\, la souris knock-in développée ouvre de nouvelles perspectives pour l’étude de la NLGN1 dans des modèles plus complexes et dans le contexte de mutations associées à des troubles neuro-développementaux. \nMots clés\nSouris knock-in\, Synapse\, Molécule d’adhérence\, Neuroligine\, Pull-down\, Imagerie de super-résolution \nPublications\n\nDucrot C*\, Drouet A*\, Tessier B\, Desquines C\, Cloâtre T\, Mazzouzi RC\, Levet F\, Favereaux A\, Letellier M\, and Thoumine O (2025). High-affinity detection of biotinylated endogenous neuroligin-1 at excitatory and inhibitory synapses using a tagged knock-in mouse. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.\, 3;122(22):e2411669122. doi.org/10.1073/pnas.2411669122\nSzíber Z\, Drouet A\, Mondin M\, Levet F\, and Thoumine O (2024). Neuroligin-1 dependent phosphotyrosine signaling in excitatory synapse differentiation. Front. Mol. Neurosci.\, 17\, 1359067. doi.org/10.3389/fnmol.2024.1359067\nLagardère M*\, Drouet A*\, Sainlos M\, and Thoumine O (2022). High-resolution fluorescence imaging combined with computer simulations to quantitate surface dynamics and nanoscale organization of neuroligin-1 at excitatory synapses. Front. Synaptic Neurosci.\, 14\, 835427. doi.org/10.3389/fnsyn.2022.835427\n\n* Equal contribution \nJury\n\n\nOlivier Thoumine\, DR\, Université de Bordeaux (Directeur de thèse)\nJean-Louis Bessereau\, PU-PH\, Université Claude Bernard Lyon 1 (Rapporteur)\nFabrice Ango\, DR\, Université de Montpellier (Rapporteur)\nAude Panatier\, DR\, Université de Bordeaux (Examinatrice)\nSabine Lévi\, DR\, Université de Bordeaux (Examinatrice)\nJérôme Ezan\, CR\, Université de Bordeaux (Examinateur)\nMagali Mondin\, IR\, Université de Bordeaux (Invitée)\n\n\n
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